2025-12-25
如何选择正确的CRISPR 试纸条？
直接法和消线法怎么选，实验人必看。
如何选择正确的CRISPR 试纸条？
CRISPR 试纸条检测原理：
当Cas蛋白被激活， reporter（报告分子）被切割；当Cas蛋白不被激活，reporter 不被切割。通过试纸条观察reporter的切割状态，从而判断Cas是否被激活，间接判断是否有扩增产物或者是否有目标DNA/RNA。根据工作原理不同，CRISPR 试纸条可以分为两种，消线法和直接法。
消线法：
在初始状态下，reporter可以被T线捕捉，T线显色。当有目标DNA/RNA的时候，Cas蛋白被激活，reporter被消除干净，T线不显色。
点评：稳定可靠。判断方式：2条线，阴性；1条线，阳性。与经典的结果判读方式有冲突，容易引起不适。
直接法：
在初始状态下，reporter可以被C线全部拦截，T线不显色。当有目标DNA/RNA的时候，Cas蛋白被激活，reporter被切开，reporter不能被C线完全拦截，T线显色。
点评：Reporter的量，需要控制的刚刚好。通过预实验，拉reporter的浓度梯度，找到它的最佳范围。对初学者，要求较高。
