H01
超灵敏扩增,适配低丰度模板场景
RCA
第二代 Phi29 聚合酶体系,增强 DNA 结合能力,具备高灵敏度与高稳定性,适合高保真扩增应用场景。
H01
超灵敏扩增,适配低丰度模板场景
H02
环状 DNA/RNA 模板下连续扩增
H03
适配测序、SNP分析及信号放大等应用场景
RCA 方案依赖环状模板进行持续扩增,能够产生长片段与大量重复序列,适用于高灵敏检测与下游分析对接。
反应条件温和,对温控设备要求低,便于流程标准化。
结合探针与读出方案,可用于 SNP 相关快速检测。
配套流程可支持现场检测与快速反馈场景。
体系稳定,可对接规模化制备与长期存储需求。
横向对比常见扩增方案的流程特征与应用边界,帮助快速选择匹配场景的方法学路径。
| 产品 | RPA | LAMP | RCA | PCR |
|---|---|---|---|---|
温度 | 37~42°C | 60~65°C | 30~42°C 或室温 | 95℃-55℃-72℃循环 |
特异性 | ||||
灵敏度 | ||||
仪器 | 简易装置 | 简易装置 | 不需要 | 精密仪器 |
反应时间 | 15~30分钟 | 20~40分钟 | >4小时 | 90~120分钟 |
成本 | 高 | 低 | 低 | 低 |
应用 |
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a)Phi29的热稳定性非常重要。EZassay Phi29是在原始蛋白的基础上进行酶功能定向进化改造而来的第二代产品,拥有超强扩增能力以及非常好的热稳定性。从而保证得到大量扩增产物。 b)由于phi29 DNA Polymerase具有较强的3’→5’外切酶活力,建议合成引物时对其3’端进行硫代磷酸酯键修饰,或使用高浓度的随机引物,以降低外切酶活力对引物的切割效应。